En thermodynamique, l'énergie interne d'un système thermodynamique, ou d'un corps aux limites bien définies, désignée par U, ou parfois E, est la somme de l'énergie cinétique due au mouvement des molécules (translation, rotation, vibration) et de l'énergie potentielle associée à l'énergie vibratoire et électrique des atomes au sein des molécules ou des cristaux. Elle comprend l'énergie de toutes les liaisons chimiques et l'énergie des électrons libres de conduction dans les métaux.

L'énergie interne est un potentiel thermodynamique et pour un système thermodynamique fermé maintenu à entropie constante, elle sera minimisée.

On peut également calculer l'énergie interne du rayonnement électromagnétique ou du corps noir. C'est une fonction d'état d'un système, une quantité importante. L'unité SI d'énergie est le joule, bien que d'autres unités historiques et conventionnelles soient toujours utilisées, comme la (petite et grande) calorie pour la chaleur. (Les calories qui figurent sur les étiquettes des aliments classiques sont en fait des kilo-calories).